| تعداد نشریات | 282 |
| تعداد نشریات سازمان | 80 |
| تعداد شمارهها | 3,196 |
| تعداد مقالات | 35,423 |
| تعداد مشاهده مقاله | 52,262,806 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 91,789,353 |
بیان پروتئین نورآمینیداز نوترکیب ویروس آنفلوانزا سویه واکسینال H1N1 در سیستم بیانی Baculovirus | ||
| تحقیقات دامپزشکی و فرآوردههای بیولوژیک | ||
| مقاله 5، دوره 37، شماره 3، مهر 1403، صفحه 42-49 اصل مقاله (1.33 M) | ||
| نوع مقاله: مقاله کامل | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.22092/vj.2024.105606.2098 | ||
| نویسندگان | ||
| مسعود مقدم پور* 1؛ مرتضی تقی زاده2؛ شهین مسعودی3؛ مجید تبیانیان4 | ||
| 1بخش تحقیق و تولید واکسن های ویروسی طیور، موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران. | ||
| 2بخش تحقیق و تولید واکسن های ویروسی انسانی(سرخک،سرخجه،اوریون) ، موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران. | ||
| 3دانشیار بخش تحقیق و تولید واکسن های ویروسی طیور، موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران | ||
| 4بخش تحقیق و تولید سرم ضد مار و عقرب، موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران | ||
| چکیده | ||
| دو آنتی ژن ساختاری هماگلوتینین (HA)و نورآمینیداز (NA)، برای توسعه یک واکسن بر پایه مهندسی ژنتیک در برابر ویروس آنفلوانزا مورد نظر محققین و تولیدکنندگان واکسن مذکور میباشند. واکسنهای نوترکیب با استفاده از روش ساده و موثر تولید میشوند و بایستی توسط یک آنتیژن خاص موجب القای پاسخ ایمنی شوند به نحوی که دارای اثربخشی بیشتری نسبت به واکسنهای دارای ویروس کامل باشند. در مطالعه حاضر، ژن نورآمینیداز سویه واکسنی H1N1 که نسبت به ژن هامگلوتینین با ثبات تر بوده و دارای موتاسیونهای کمتری میباشد توسط واکنش زنجیرهای پلیمراز (PCR) تکثیر شد و سپس در حامل بیانی یوکاریوتی HTA pFastBac قرار گرفت. بیان پروتئین نورآمینیداز بوسیله آزمایش PAGE-SDS و وسترن بلات با استفاده از آنتیبادی پلی کلونال تجاری علیه نورآمینیداز مورد بررسی قرار گرفت. علاوه براین، از روش ایمونوفلورسانس کیفی به منظور ارزیابی آنتیژن و فعالیت بیولوژیکی پروتئین نوترکیب نورآمینیداز در سطح سلول حشره (Sf9) آلوده شده به باکولوویروس حامل ژن نورآمینیداز با استفاده از آنتیسرم خرگوش واکسینه استفاده گردید. در نهایت با توجه به کلون تاییدشده ژن نورآمینیداز میتوان ادعا نمود که برای ساخت واکسن نوترکیب آنفلوانزای انسانی قدم مهم و اساسی برداشته شده است. | ||
| کلیدواژهها | ||
| آنفلوانزا؛ ریورس ژنتیک؛ نورآمینیداز؛ واکسن ریکامبیننت؛ باکولوویروس | ||
| عنوان مقاله [English] | ||
| Construction of recombinant protein Influenza A Virus Neuraminidase Gene expression in Baculovirus | ||
| نویسندگان [English] | ||
| Masoud Moghaddam Pour1؛ Morteza Taghizade2؛ shahin Masoudi3؛ Majid Tebianian4 | ||
| 2member of scientific staff | ||
| 3Associate Professor,Department of Research and Production of Poultry Viral Vaccine, Razi Vaccine and Serum Research institute, Agricultural Research Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran | ||
| 4Department of Research and Production of antiserum , Razi Vaccine and Serum Research institute, Agricultural Research Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran | ||
| چکیده [English] | ||
| Two structural antigens, haemagglutinin (HA) and neuraminidase (NA), are attractive candidates for the development of a genetically engineered vaccine against influenza. Recombinant vaccines are produced by a simple and effective method, although expected to induce an immune response to a specific antigen, remain to be further improved for their high effectiveness. On the other hand, a potent and effective vaccine against influenza should be able to induce both humoral and cellular immune responses. In the present study, the NA gene, which is more stable than the HA one, was amplified by polymerase chain reaction (PCR), and the band appeared in the range of 1400 bp. Then cloned into a eukaryotic expression vector pFastBac HTA. The purity of the expressed NA protein was analyzed on SDS-PAGE electrophoresis. In the western blot, a band with a weight of about 41 kDa produced by the recombinant baculovirus containing NA is observed compared to the uninfected cells used as a negative control, and a recombinant neuraminidase is confirmed. Finally, neuraminidase (NA) gene clone can be used to make recombinant human influenza vaccine. | ||
| کلیدواژهها [English] | ||
| "influenza", " reverse genetics", "neuraminidase", "recombinant vaccine", "baculovirus" | ||
| مراجع | ||
|
| ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 596 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 440 |
||