1گروه میکروبیولوژی، واحد کرمان، دانشگاه آزاد اسلامی، کرمان، ایران
2بخش تحقیقات و فناوری، شعبه کرمان، موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرمان، ایران
3بخش تحقیق و توسعه، شعبه کرمان، موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرمان، ایران
چکیده
کلستریدیوم پرفرنجنس تیپ C عامل انتروتوکسمی در دام های جوان و بالغ و از عوامل مهم خسارات اقتصادی به صنعت دامپروری میباشد. مهمترین عامل ویرولانس در این تیپ، توکسین بتا است. در دهههای اخیر استفاده از نانوذرات برای بهبود اثر واکسنها موردتوجه قرار گرفته است. جهت افزایش بقاء نانوذرات، از غشاء سلولهایی همچون گویچه قرمز برای پوشش استفاده میگردد، لذا تحقیق حاضر باهدف ارزیابی مقایسهای پاسخ ایمنیزایی نانوآنتیژن بتا کلســتریدیوم پرفرنجنس پوشش داده شده با غشاء گویچه قرمز و بدون پوشش انجام گرفت. ابتدا نانوآنتیژنهای محبوس در غشاء گویچههای قرمز آماده و پس از انجام آزمون های استرلیتی و عدم سمیت، به همراه نانوآنتیژنهای بدون پوشش طبق برنامه ایمنسازی و در بازه زمانی ۱۵۰ روز، به دو گروه خرگوش تزریق شدند. جهت ارزیابی تیتر آنتیبادی از روش الیزای غیرمستقیم استفاده شد. جهت نشاندادن قابلیـت ایمنیزایی نانوذرات پوشش یافته با غشاء گویچه قرمز، چالش و تست همولیزین انجام شد. تعیین پاسخ آنتیبادی، تحریک ایمنیزایی بالا و افزایش پایدار تیتر آنتیبادی در گروه ایمن با نانوآنتیژنهای محبوس در غشاء گویچه قرمز را نشان داد. ارزیابی چالش و تست همولیزین بیانگر فعالیت مثبت نانوآنتیژن بتا پوشش یافته با غشاء گویچه قرمز در تحریک سیستم ایمنی خرگوش بود. نتایج مطالعه نشان داد که غشاءهای گویچه قرمز یک لایه ایمن برای مهار نانوتوکسین فراهم میکنند و سبب رهایش آهسته و تدریجی آنتیژنهای کپسوله میشوند.
Comparative evaluation of the immunogenic response of Clostridium perfringens beta-antigen coated with RBC membrane and uncoated in rabbit as an animal model
1Department of Microbiology, Kerman Branch, Islamic Azad University, Kerman, Iran.
2Department of Research and Technology, Kerman Branch, Razi Vaccine & Serum Research Institute, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Kerman, Iran
3Department of Research and Development, Kerman Branch, Razi Vaccine & Serum Research Institute, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Kerman, Iran
چکیده [English]
Clostridium perfringens (C. perfringens) type C is the cause of enterotoxemia in young and adult cattle and one of the important factors of economic losses to the animal husbandry industry. The most important virulence factor in this type is beta toxin. In recent decades, the use of nanoparticles to improve the effectiveness of vaccines has been considered. In order to increase the survival of nanoparticles, the membrane of cells such as red blood cells is used for coating; The aim of comparative evaluation of the immunogenic response of C. perfringens beta-antigen coated with RBCMs and uncoated. First, nanoantigens trapped in the membrane of RBC were prepared then sterility and residual toxicity tests were carried out. Finally it injected into two groups of rabbits along with bare nanoantigens according to the immunization schedule and within a period of 150 days. The indirect ELISA method was used to evaluate the antibody titer. In order to demonstrate the immunogenicity of nanoparticles coated with RBCMs, the challenge and hemolysin tests were performed. Determining the antibody response showed high immunogenic stimulation and a stable increase in antibody titer in the immune group with nanoantigens trapped in the RBCMs. Challenge evaluation and hemolysin test showed the positive activity of beta nanoantigens covered with red RBCMs in stimulating the immune system of rabbits. The results of the study showed that the RBCMs provide a safe layer to contain the nanotoxin and cause the slow and gradual release of encapsulated antigens.