1Parasitology department, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO),
2Department of Microbiology, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran.
چکیده
Introduction: Toxoplasma gondii, an obligate intracellular apicomplexan parasite, is a globally significant cause of reproductive failure in small ruminants, inflicting considerable economic burdens on the livestock industry. This investigation was undertaken to determine the molecular prevalence of T. gondii DNA in aborted ovine fetuses originating from Qazvin province, a strategically important region in central Iran. Methods: From 2019 to 2023, a total of 100 tissue specimens—comprising brain (n=39), placenta (n=8), embryonic membranes (n=7), cotyledons (n=7), umbilical cord (n=2), and pooled homogenates of visceral organs (n=37)—were collected from 47 aborted sheep fetuses. Following genomic DNA extraction via the phenol-chloroform technique, a nested PCR (n-PCR) assay targeting the GRA6 locus was employed for the specific identification of T. gondii. Positive amplicons were subsequently subjected to bidirectional sequencing for phylogenetic characterization. Results: Toxoplasma gondii DNA was identified in 24 (51.1%; 95% CI: 36.8–65.4%) of the 47 aborted fetuses examined. Brain tissue exhibited the highest rate of positivity (43.6%; 17/39). A statistically significant (P = 0.009) upward temporal trajectory in infection rates was observed, escalating from 44.4% (8/18) in 2019 to 85.7% (6/7) in 2022. Phylogenetic inference based on GRA6 sequences (GenBank accession nos. OL825741–OL825744) placed the Iranian isolates within a clade containing reference strains from diverse geographic and host origins.
Conclusion: The findings affirm a substantial prevalence (51.1%) of T. gondii in aborted ovine fetuses from Qazvin province, reinforcing its etiological importance in ovine abortions. Brain tissue emerges as the preferred specimen for molecular diagnostic applications.
شناسایی مولکولی و مطالعه فیلوژنتیک توکسوپلاسما گوندی در جنین های سقط شده گوسفند از استان قزوین: یک مطالعه مقطعی
چکیده [English]
مقدمه: توکسوپلاسما گوندی یک انگل پروتوزوآی درونسلولی اجباری و یکی از علل اصلی نارسایی تولیدمثل در نشخوارکنندگان کوچک است که منجر به خسارات اقتصادی قابل توجهی در سراسر جهان میشود. این مطالعه با هدف بررسی شیوع مولکولی DNA توکسوپلاسما گوندی در جنینهای سقطشده گوسفند در استان قزوین، یک منطقه کلیدی در مرکز ایران، انجام شد. مواد و روشها: بین سالهای ۱۳۹۸ تا ۱۴۰۲، مجموعاً ۱۰۰ نمونه بافتی (مغز (۳۹n=)، جفت (۸n=)، غشای جنینی (۷n=)، کوتیلدون (۷n=)، بند ناف (۲n=) و مخلوط همگنشده احشایی (قلب، کبد، طحال و دستگاه گوارش) (۳۷n=) از ۴۷ رأس جنین سقطشده گوسفند جمعآوری شد. DNA با استفاده از روش فنل کلروفرم استخراج گردید و از یک واکنش زنجیرهای پلیمراز آشیانهای (nested PCR یا n-PCR) با هدف ژن GRA6 برای تشخیص اختصاصی توکسوپلاسما گوندی استفاده شد. نمونههای مثبت برای تعیین توالی دوطرفه و تحلیل فیلوژنتیک مورد استفاده قرار گرفتند. یافتهها: DNA توکسوپلاسما گوندی در ۲۴ مورد از ۴۷ جنین سقطشده (51.1٪؛ ۹۵٪ فاصله اطمینان: 36.8–65.4٪) شناسایی شد. بیشترین میزان آلودگی در بافت مغز مشاهده گردید (۶/۴۳٪؛ ۱۷ از ۳۹). یک روند افزایشی معنیدار در میزان آلودگی در طول سالهای مطالعه مشاهده شد، از 44.4٪ (۸ از ۱۸) در سال ۱۳۹۸ به ۸5.7٪ (۶ از ۷) در سال 1402(P = 0.009). تحلیل فیلوژنتیک توالیهای ژن GRA6 (شماره دسترسیهای OL825741-OL825744 در GenBank) جدایههای ایرانی را در یک کلاد (شاخه) مشترک با توالیهای مرجع از میزبانها و مناطق جغرافیایی مختلف قرار داد. نتیجهگیری: این مطالعه شیوع بالای DNA توکسوپلاسما گوندی (51.1%) را در جنینهای سقطشده گوسفند در استان قزوین تأیید میکند و نقش مهم آن را به عنوان یکی از علل اصلی نارسایی تولیدمثلی در نشخوارکنندگان کوچک برجسته میسازد. بافت مغز به عنوان نمونه ارجح برای کاربردهای تشخیص مولکولی معرفی میشود.
کلیدواژهها [English]
توکسوپلاسما گوندی, سقط جنین گوسفند, نستد پی سی آر, ژن گرا 6, قزوین, ایران
آمار
تعداد مشاهده مقاله: 3
تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 1
سامانه مدیریت نشریات علمی. طراحی و پیاده سازی از سیناوب