| تعداد نشریات | 282 |
| تعداد نشریات سازمان | 80 |
| تعداد شمارهها | 3,197 |
| تعداد مقالات | 35,446 |
| تعداد مشاهده مقاله | 52,501,398 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 91,938,511 |
Recombinant Production and Immunogenicity Assessment of Pseudomonas aeruginosa Exotoxin A and PilA Fragments in a Murine Model | ||
| Archives of Razi Institute | ||
| مقالات آماده انتشار، پذیرفته شده، انتشار آنلاین از تاریخ 10 خرداد 1405 اصل مقاله (1.17 M) | ||
| نوع مقاله: Original Articles | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.22092/ari.2026.370684.3903 | ||
| نویسندگان | ||
| Nasrin Naimi Shamel1؛ Mohsen Fathi Najafi* 2؛ Majid Moghbeli3؛ Samaneh Dolatabadi4 | ||
| 1Department of microbiology, Damghan Branch, Islamic Azad University, Damghan, Iran. | ||
| 2Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agriculture Research, Education and Extension Organization (AREEO), Mashhad, Iran. | ||
| 3Department of Biology, Damghan Branch, Islamic Azad University, Damghan, Iran. | ||
| 4Department of Microbiology, Neyshabur Branch, Islamic Azad University, Neyshabur, Iran. | ||
| چکیده | ||
| Introduction: Exotoxin A and pili are key virulence factors of Pseudomonas aeruginosa, and their neutralization is a promising strategy to prevent or attenuate infections caused by this pathogen. Objective: To evaluate the immunogenicity of recombinant exotoxin A and pilin A (PilA) fragments as conserved antigens against different P. aeruginosa serotypes. Materials and Methods: Genomic DNA was extracted from P. aeruginosa using the phenol–chloroform method, and exoA and pilA genes were amplified by PCR with specific primers. Purified PCR products were cloned into the pGEM vector and transformed into Escherichia coli DH5α. After confirmation by restriction digestion with BamHI and XhoI, the inserts were subcloned into the pET 26b expression vector and introduced into E. coli BL21 (DE3). Recombinant proteins were expressed, purified, and analyzed by SDS PAGE, which showed bands of approximately 21–23 kDa for EXO and PILI. Expression of pET 26b/PilA in E. coli BL21 (DE3) yielded about 12% (v/v) protein after 5 h of IPTG induction. Purified proteins were injected into BALB/c mice with experimental burn injuries. Humoral immune responses were assessed by antigen specific ELISA, and protein expression and antigenicity were confirmed by dot blot and Western blot. Results: Immunization with recombinant exotoxin A and PilA induced robust antigen specific antibody responses in mice, indicating strong immunogenicity. Conclusion: Recombinant exotoxin A and PilA produced in this study showed promising potential as vaccine candidates against P. aeruginosa. Immunization with these conserved components may offer an effective strategy for preventing infections caused by multiple P. aeruginosa serotypes. | ||
| کلیدواژهها | ||
| Exotoxin A؛ Immunogenicity؛ Pili P؛ Pseudomonas aeruginosa؛ Vaccine | ||
| عنوان مقاله [English] | ||
| تولید نوترکیب و ارزیابی ایمنیزایی قطعات اگزوتوکسین A و PilA باکتری Pseudomonas aeruginosa در یک مدل موشی | ||
| چکیده [English] | ||
| مقدمه: اگزوتوکسین A و پیلی از عوامل اصلی ویرولانس Pseudomonas aeruginosa هستند و خنثیسازی آنها راهبردی امیدبخش برای مقابله با عفونتهای ناشی از این باکتری است. هدف: ارزیابی ایمنیزایی پروتئینهای نوترکیب اگزوتوکسین A و پیلی A (PilA) بهعنوان آنتیژنهای حفاظتشده علیه سروتیپهای مختلف P. aeruginosa. مواد و روشها: DNA ژنومی P. aeruginosa با روش فنل–کلروفرم استخراج و ژنهای exoA و pilA با PCR تکثیر شدند. محصولات در وکتور pGEM کلون و به E. coli DH5α ترانسفورم گردیدند. پس از تأیید با هضم BamHI و XhoI، اینسرتها به وکتور بیانی pET‑26b سابکلون و به E. coli BL21 (DE3) منتقل شدند. پروتئینهای نوترکیب بیان، خالصسازی و با SDS‑PAGE بررسی شدند (وزن مولکولی حدود ۲۱–۲۳ کیلو دالتون). پروتئینهای خالصشده به موشهای BALB/c با سوختگی تجربی تزریق و پاسخ هومورال با ELISA، داتبلات و وسترنبلات ارزیابی شد. نتایج: ایمنسازی با پروتئینهای نوترکیب اگزوتوکسین A و PilA، پاسخ آنتیبادی اختصاصی و قابلتوجهی در موشها القا کرد. نتیجهگیری: اگزوتوکسین A و PilA نوترکیب تولیدشده در این مطالعه، پتانسیل مناسبی بهعنوان کاندیدای واکسن علیه عفونتهای P. aeruginosa دارند و میتوانند برای پیشگیری از عفونتهای ناشی از سروتیپهای مختلف این باکتری به کار روند. | ||
| کلیدواژهها [English] | ||
| اگزوکسین A, ایمنیزایی, پیلی P, سودوموناس آئروژینوزا, واکسن | ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 36 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 54 |
||