Tabatabaee, Seyed Sina, Ahmadi-hamedani, Mahmood, Sani, Reza, Staji, Hamid. (1404). Diagnostic Performance of RT-PCR for Fetal Sex Determination Using Cell-Free Fetal DNA in Maternal Plasma during the Last Third of the First Trimester in Mares. سامانه مدیریت نشریات علمی, (), -. doi: 10.22092/ari.2025.370005.3734
Seyed Sina Tabatabaee; Mahmood Ahmadi-hamedani; Reza Sani; Hamid Staji. "Diagnostic Performance of RT-PCR for Fetal Sex Determination Using Cell-Free Fetal DNA in Maternal Plasma during the Last Third of the First Trimester in Mares". سامانه مدیریت نشریات علمی, , , 1404, -. doi: 10.22092/ari.2025.370005.3734
Tabatabaee, Seyed Sina, Ahmadi-hamedani, Mahmood, Sani, Reza, Staji, Hamid. (1404). 'Diagnostic Performance of RT-PCR for Fetal Sex Determination Using Cell-Free Fetal DNA in Maternal Plasma during the Last Third of the First Trimester in Mares', سامانه مدیریت نشریات علمی, (), pp. -. doi: 10.22092/ari.2025.370005.3734
Tabatabaee, Seyed Sina, Ahmadi-hamedani, Mahmood, Sani, Reza, Staji, Hamid. Diagnostic Performance of RT-PCR for Fetal Sex Determination Using Cell-Free Fetal DNA in Maternal Plasma during the Last Third of the First Trimester in Mares. سامانه مدیریت نشریات علمی, 1404; (): -. doi: 10.22092/ari.2025.370005.3734
Diagnostic Performance of RT-PCR for Fetal Sex Determination Using Cell-Free Fetal DNA in Maternal Plasma during the Last Third of the First Trimester in Mares
1Department of Clinical Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Semnan University, Semnan, Iran.
2Department of Pathobiology, Faculty of Veterinary Medicine, Semnan University, Semnan, Iran.
چکیده
Accurately determining fetal sex early in mares is essential for horse breeding. In this study, we investigated the detection of cell-free fetal DNA (cffDNA) in horse serum using RT-PCR during pregnancy. Blood samples were obtained from 30 pregnant mares in the last third of the first trimester of gestation at stables located in the provinces of Semnan, Golestan, and Tehran. In addition, blood samples were taken from one male foal and one female foal with no history of mating to serve as positive and negative controls, respectively. The phenotypic sex of the foals was recorded after parturition and compared with RT-PCR results performed on maternal plasma to evaluate the accuracy of fetal sex determination using the sex-determining region Y (SRY), equine Y‑linked microsatellite marker YH12 (Eca.YH12), and microsatellite locus TKY270 on the equine X chromosome (TKY270) gene markers. A total of 30 pregnant mares were sampled, with 27 carrying to term and three aborting. Fetal sex was confirmed postnatally (11 males, 16 females). The SRY marker had a sensitivity of 72.7%, specificity of 100%, and accuracy of 88.9%. Eca.YH12 marker yielded the same results as SRY and did not enhance sensitivity when used in combination. The X-linked marker TKY270 was detected in all samples, indicating that the samples were of high quality and could serve as an internal control. These markers supported our results, strengthening the diagnostic process. RT-PCR for the SRY gene detected cffDNA in the last third of the first trimester and worked well, especially for identifying female fetuses. These findings were further supported by the results obtained from the Eca.YH12 and TKY270 genetic markers.
عملکرد تشخیصی RT-PCR در تعیین جنسیت جنین با استفاده از DNA آزاد جنینی موجود در پلاسمای مادر در یک سوم پایانیِ سهماهه نخست بارداری در مادیانها
چکیده [English]
تعیین دقیق جنسیت جنین در مادیانها در مراحل ابتدایی برای پرورش اسب ضروری است. در این مطالعه، ما به بررسی شناسایی DNA آزاد جنینی (cffDNA) در سرم اسبها با استفاده از RT-PCR در طول بارداری پرداختیم. نمونههای خون از ۳۰ مادیان باردار در یکسوم آخر سهماهه اول بارداری در اصطبلهایی واقع در استانهای سمنان، گلستان و تهران جمعآوری شد. علاوه بر این، نمونههای خون از یک مادیان نر و یک مادیان ماده بدون سابقه جفتگیری بهعنوان کنترلهای مثبت و منفی بهترتیب گرفته شد. جنسیت فنوتیپی مادیانها پس از زایمان ثبت و با نتایج RT-PCR انجام شده بر روی پلاسما مادر مقایسه شد تا دقت تعیین جنسیت جنین با استفاده از ناحیه تعیین جنسیت Y (SRY)، نشانگر میکروساتیلیت YH12 وابسته به Y اسب (Eca.YH12) و نشانگرهای ژنی میکروساتیلیت TKY270 روی کروموزوم X اسب (TKY270) ارزیابی شود. در مجموع، از ۳۰ مادیان باردار نمونهبرداری شد که ۲۷ مورد به زایمان کامل رسیدند و سه مورد سقط کردند. جنسیت جنین پس از زایمان تأیید شد (۱۱ نر، ۱۶ ماده). نشانگر SRY دارای حساسیت ۷۲.۷٪، ویژگی ۱۰۰٪ و دقت ۸۸.۹٪ بود. نشانگر Eca.YH12 نتایج مشابهی با SRY داشت و در ترکیب با آن حساسیت را افزایش نداد. نشانگر وابسته به X TKY270 در تمام نمونهها شناسایی شد، که نشاندهنده کیفیت بالای نمونهها و امکان استفاده از آنها بهعنوان کنترل داخلی بود. این نشانگرها نتایج ما را پشتیبانی کرده و فرآیند تشخیص را تقویت کردند. RT-PCR برای ژن SRY در آخرین یک سوم سهماهه اول، cffDNA را شناسایی کرد و بهویژه برای شناسایی جنینهای مؤنث عملکرد خوبی داشت. این یافتهها با نتایج بهدستآمده از نشانگرهای ژنتیکی Eca.YH12 و TKY270 بیشتر تأیید شد.
کلیدواژهها [English]
cffDNA, تعیین جنسیت جنین, مادیان, RT-PCR, ژن SRY
آمار
تعداد مشاهده مقاله: 2
تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 4
سامانه مدیریت نشریات علمی. طراحی و پیاده سازی از سیناوب