هدف از انجام آزمایش، تشخیص سریع بعضی از مکانیزمهای مقاومت به علفکش تریبنورونمتیل در علف هرز خردل وحشی(Sinapis arvensis) بود که به این منظور از میکرونیدل کیتوزان جهت استخراج DNA و از توالییابی ژن استولاکتاتسنتاز (ALS) جهت تشخیص جهش و همینطور استفاده از مالاتیون برای تعیین مکانیزم مقاومت متابولیسمی استفاده شد. نتایج پژوهش نشان داد استفاده از میکرونیدل، مدت زمان استخراج DNA را نسبت به روش معمولی، به پنج دقیقه کاهش داد. توالیهای ژن ALS در تودههای FR3 (مقاوم) و S (حساس) در مقایسه با توالیهای مرجع موجود در بانک ژن تفاوتی نداشته؛ در نتیجه هیچگونه جهشی در ژن مذکور مشاهده نشد. در آزمایش دز-پاسخ با دزهای مختلف علفکش تریبنورونمتیل (تا هشت برابر دز توصیهشده 20 گرم ماده موثره در هکتار) که با پیشتیمار مالاتیون ) دز 1000 گرم ماده موثره در هکتار) دو ساعت قبل از تیمارهای علفکش و همینطور بدون پیشتیمار مالاتیون اعمال شدند، توده مقاوم FR3 نسبت به توده حساس (S)، 23 برابر مقاومت بیشتر در حضور علفکش تریبنورونمتیل و بدون پیشتیمار مالاتیون داشت. همچنین پیشتیمار مالاتیون نسبت به عدم استفاده از آن بهطور معنیداری ((p≤0.01 درجه مقاومت توده FR3 را کاهش داد )15/1 =RI) که نشاندهنده مکانیزم مبتنی بر متابولیسم تریبنورونمتیل در توده فوق میباشد.
Investigating the Resistance Mechanisms of Wild Mustard (Sinapis arvensis) to the Herbicide Tribenuron-Methyl
نویسندگان [English]
bahman ashkani
چکیده [English]
The present experiment set out to rapidly detect some mechanisms of resistance to the herbicide tribenuron-methyl in Sinapis arvensis. For this purpose, a chitosan microneedle was utilized to extract DNA, and then, to detect mutations, sequencing of the acetolactate synthase (ALS) gene through PCR product was carried out. During a separate process, the insecticide malathion was also used to determine the metabolic resistance mechanism. The results of the present study indicated that using the microneedle reduced the DNA extraction time to five minutes compared to the conventional approach. The ALS gene sequences in the FR3 (resistant) and S (susceptible) populations did not differ from the sensitive sequences available in GenBank; therefore, no mutations were observed in the gene. In a dose-response experiment with different doses of the herbicide tribenuron-methyl (up to eight times the recommended dose; that is, 20 grams of active ingredient per hectare), applied with pretreatment of malathion (a dose of 1000 grams of active ingredient per hectare) two hours before the herbicide treatments, and without malathion pretreatment as well, the resistant FR3 population had 23 times more resistance than the susceptible (S) population in the presence of tribenuron-methyl and without malathion pretreatment. Pretreatment with malathion significantly (p≤ 0.01) reduced herbicide resistance (RI= 1.15) in the FR3 population, which indicated metabolism-based resistance to tribenuron-methyl.
کلیدواژهها [English]
DNA extraction, gene sequencing, herbicide resistance, microneedle
مراجع
آمار
تعداد مشاهده مقاله: 1
تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 3
سامانه مدیریت نشریات علمی. طراحی و پیاده سازی از سیناوب