اخبار و اعلانات

 آمار

تعداد نشریات282
تعداد نشریات سازمان80
تعداد شماره‌ها3,230
تعداد مقالات35,784
تعداد مشاهده مقاله54,009,502
تعداد دریافت فایل اصل مقاله93,167,888
Motedayen, mohammad, zolfagharian, Hossein. (1403). Production of an efficient enzymatically Fab fragment antivenom against of Cobra snake (Naja naja oxiana) venom. سامانه مدیریت نشریات علمی, 79(2), 411-417. doi: 10.32592/ARI.2024.79.2.411
mohammad hasan Motedayen; Hossein zolfagharian. "Production of an efficient enzymatically Fab fragment antivenom against of Cobra snake (Naja naja oxiana) venom". سامانه مدیریت نشریات علمی, 79, 2, 1403, 411-417. doi: 10.32592/ARI.2024.79.2.411
Motedayen, mohammad, zolfagharian, Hossein. (1403). 'Production of an efficient enzymatically Fab fragment antivenom against of Cobra snake (Naja naja oxiana) venom', سامانه مدیریت نشریات علمی, 79(2), pp. 411-417. doi: 10.32592/ARI.2024.79.2.411
Motedayen, mohammad, zolfagharian, Hossein. Production of an efficient enzymatically Fab fragment antivenom against of Cobra snake (Naja naja oxiana) venom. سامانه مدیریت نشریات علمی, 1403; 79(2): 411-417. doi: 10.32592/ARI.2024.79.2.411

Production of an efficient enzymatically Fab fragment antivenom against of Cobra snake (Naja naja oxiana) venom

Archives of Razi Institute
مقاله 23، دوره 79، شماره 2، خرداد و تیر 2024، صفحه 411-417    اصل مقاله (452.48 K)
نوع مقاله: Original Articles
شناسه دیجیتال (DOI): 10.32592/ARI.2024.79.2.411
نویسندگان
mohammad hasan Motedayen* 1؛ Hossein zolfagharian2
1plasma dept.
2plasma purification dept.
چکیده
َAbstract
Since about 100 years ago, the best and main treatment for millions of global snakebite victims has been the use of polyclonal antivenoms. However, common antivenoms need continuous improvement to reduce rare, their side effects and get faster performance. In this study, by papain digestion of anti-cobra venom plasma and subsequently multi-step purification and optimization, including, ammonium sulfate precipitation and subsequently DEAE-cellulose column chromatography, Fab antivenom was produced. Then, by SDS-PAGE method, and double immunodifusion (Ouchterlony) tests the existence of the corresponding Fab fragment antibody was seen and confirmed. Also, in potency test in NIH laboratory mice, it was found that each milliliter of the new Fab antivenom was able to neutralize 624 micrograms, (80LD50) of cobra venom, which is about 15% more efficient than the primary plasma in the same concentration and also, 1.57 times more than the cobra antivenom which found in commercial hexavalent antivenom of Razi Institute respectively. According to the results, it seems that this new Fab antivenom can be used as a new candidate for the treatment of cobra snake bite victims.  
 
کلیدواژه‌ها
Fab antivenom؛ Naja naja oxiana؛ DEAE-cellulose؛ ammonium sulfate؛ cobra snake
عنوان مقاله [English]
تولید پادزهر کارآمد قطعه فَب برعلیه زهر مار کبری (ناجا ناجا اُکسیانا ) به روش آنزیمی
چکیده [English]
خلاصه : آمار مارگزیدگی توسط مارهای زهری تا 5 میلیون نفر در جهان بالغ می گردد و میزان مرگ و میر ناشی از آن نیز حدود 100000 نفر در سال است. در ایران مارگزیدگی سالانه حدود ده هزار نفر است و خوشبختانه میزان مرگ و میر آن بالا نیست، اما به دلیل ناتوانی های جسمی که در قربانیان مارگزیدگی ایجاد می گردد، این گونه گزش ها یک تهدید بالقوه محسوب می شود. از حدود 100 سال پیش بهترین و اصلی ترین درمان برای مارگزیدگی استفاده از پادزهرهای پلی کلونال بوده است. با این حال، به دلیل داشتن یک سری مشکلات نادر، پادزهر های رایج نیاز به بهبود مستمر دارند تا عوارض جانبی آنها کاهش داده شده و عملکرد سریع‌تری پیدا کنند. در این مطالعه، با هضم پاپائینی پلاسمای اسب تولید شده برعلیه زهر مار کبری (Naja naja oxiana) و متعاقباً تصفیه و بهینه سازی چند مرحله ای شامل ترسیب با سولفات آمونیوم و سپس کروماتوگرافی سلولز DEAE- ، پادزهر حاوی قطعه فَب تولید گردید. سپس با تست SDS-PAGE و ایمونودیفیوژن (AGID) وجود آنتی بادی متناظر با قطعه Fab آنتی بادی تایید شد. همچنین در آزمایش قدرت سنجی در موش های آزمایشگاهی نژاد NIH ، هر میلی لیتر از پادزهر جدید فَب توانست 624 میکروگرم یا به عبارتی LD50 80 زهر کبری را خنثی کند که به ترتیب 3/2 برابر از پلاسمای خام اولیه و 57/1 برابر از پادزهر تجاری شش ظرفیتی حاوی قطعه F(ab)2 آنتی بادی موسسه رازی، بیشتر می باشد. با توجه به نتایج بدست آمده به نظر می رسد که پادزهر جدید فَب می تواند به عنوان نامزد جدید برای درمان قربانیان مارگزیدگی با مار کبری مورد استفاده قرار گیرد.
کلیدواژه‌ها [English]
آنتی ونوم فب, ناجا ناجا اُکسیانا, دی ای آ ای - سلولز, سولفات آمونیوم, مار کبری
سایر فایل های مرتبط با مقاله
مراجع
  1. Abbas AK., Lichtan AH, Pillai Sh. Cellular and molecular. Immunology Translators: Musa MA, Mohsen S, Khosrow S, Mohammad H Gh., Mohammad HV, Laleh H. Publishers, Arjmand, second edition,1389.
  2. Amrullahi BE. Identification and purification of anticoagulant agent in Jafari Viper. Master's Thesis of Faculty of Basic Sciences and Agriculture, Payame Noor University, Tehran, 1390
  3. Ana CG, Elsa B. Antibody purification: ammonium sulfate fractionation or gel filtration. Methods Mol. Biol. 2010; 588: 15-26
  4. Ariaratnam CA, Meyer WP, Perera G, Eddleston M, Kuleratne SAM, Attapattu W, Sheriff R, Richards AM, Theakston RDG, Warrell DA. A new monospecific ovine Fab fragment antivenom for treatment of envenoming by the Sri Lankan Russellˊsnviper (Daboia RusseLII RusseLII): A preliminary dose-finding and pharmacokinetic study. Am. J. Trop. Med. Hyg. 1999; 61(2): pp: 295-265
  5. Elda ES, Jacob AG, John CP, Alexis RA, Peter BC John CP. The efficacy of two antivenoms against the venom of North American snakes,Toxicon. 2003; 41(3): 357-365
  6. Hafezi Gh, Rahmani A, Soleymani M, Nazari P. An Epidemiologic and Clinical Study of Snake Bites during a Five-Year Period in Karoon, Iran. ASIA PACIFIC JOURNAL of Medical Toxicology APJMT, 2018;7(1):13-16.
  7. Harry F, Williams HJ, Layfield T, Vallance K, Patel AB, BicknellSA, Trim SV. The Urgent Need to Develop Novel Strategies for the Diagnosis and Treatment of Snakebites. Toxins. 2019; 11(6):363.
  8. Helen M, Paterson Y. Production of antibodies. Current protocols in immunology. 2001;2: 2.4.1-2.4.9.
  9. Hui C, Jun-Sheng C, Pameila P, Tanja J, Si-Yi B, Jian-Wei Z, Yun-Sheng Y. Strategies and Applications of Antigen-Binding Fragment (Fab) Production in Escherichia coli. Pharmaceutical Fronts. 2021;3(2):39-49.
  10. Hyung-Nam S, Dong-Hyung K, Sung-Goo P, Myung KL, SeHwan P, Eui-Jeon W. Purification and characterization of Fab fragments with rapid reaction kinetics against myoglobin. Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry. 2014;79(5):718–724.
  11. Ibrahim Al-A, Nicholas RC, John L. Single-reagent one-step procedure for the purification of ovine IgG, F(ab')2 and Fab antivenoms by caprylic acid. J. of Immunological Methods. 2014;402(1-2):15-22.
  12. Koh DCI, Armugam A, Jeyaseelan K. Snake venom components and their applications in biomedicine. Cell. Mol. Life Sci. 2006;63:3030-3041.
  13. Latifi M. Snakes of Iran, first ed.; Published by Environmental Protection Org. 1991; Pages: 159.
  14. Marija B, Daniel XJ, Barbara GK, Thomas CM, Mats AAP, Felix AR. Efficient method for production of high yields of Fab fragments in Drosophila S2 cells. Protein Engineering, Design & Selection, 2010;23(4):169-174
  15. Matthew C, Hanieh K. Soluble papain to digest monoclonal antibodies; time and cost-effective method to obtain Fab fragment. Bioengineering. 2022;9(5):209.
  16. Michella MM, Andrew P. A simple, non-chromatographic procedure to purify immunoglobulins from serum and ascites fluid. J of Immunological methods. 1987;96:271-278
  17. Motedayen MH, Nikbakht BGH, Rasaee MJ, Zare MA, khorasani A, Eizadi H, Ranjbar MM, Azimi M, Esmaelizad M. Production of a Human Recombinant Polyclonal Fab Antivenom against Iranian Viper Echis carinatus. Archives of Razi Institute, 2018;73(4):287-294.
  18. Motedayen MM, Nikbakhat B GH, Rasaee MJ, Zare MA. Production of recombinant Fab fragment of polyclonal antibody against venom of poisonous snakes, using a phage display library technique and evaluation of its antivenom activity in Syrian laboratory mouse. University of Tehran, faculty of veterinary medicine. Thesis. 2018;73(4):287-294.
  19. Nicolas A, Julien M, Jean CP, Herve R, Max G, Christiane D, Philippe B. Engineering of a recombinant Fab from a neutralizing IgG directed against scorpion neurotoxin AahI, and functional evaluation versus other antibody fragments. Toxicon. 2004;43:233–241
  20. Pavinee S, Sukanya E Kavi R.. A study on the use of caprylic acid and ammonium sulfate in combination for the fractionation of equine antivenom F(ab')2. Biologicals. 2012;40(5):338-44.
  21. Robert R, Eric B, Elisabeth TW, Eran R, Rivka A, Yael Y, Michael M, Irina C, Sarit K, Dalia R, Achim K, Silke R, Josef P, Karin J, Dirk W, Susanne B, Titus K, Avner Y, Christine R. Human combinatorial Fab library yielding specific and functional antibodies against the human fibroblast growth factor receptor 3. 2003;278(40):38194-205.
  22. Teimurzadeh Sh, Zare MA. Poisonous snakes of Iran. Prevention and first aid and treatment. Publishers, Teimurzadeh. 1388.
  23. Tizard A. Veterinary immunology. Translators: Rabbani M, Mahzounieh M, Publishing and printing. Institute of Tehran University. 1383
  24. WHO. Guidelines for the Production, Control and Regulation of Snake Antivenom Immunoglobulins. 2016.
  25. Yonghong Z, Lester G, Haiyan J, Audrey B, Eric E, Galina O, Jill C, Susann T, Bernard A. Two routes for production and purification of Fab fragments in biopharmaceutical discovery research: Papain digestion of mAb and transient expression in mammalian cells. Protein Exper. Purif. 2009;67(2):182-9.
آمار
تعداد مشاهده مقاله: 12,354
تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 935


counter
سامانه مدیریت نشریات علمی. طراحی و پیاده سازی از سیناوب