اخبار و اعلانات

 آمار

تعداد نشریات284
تعداد نشریات سازمان82
تعداد شماره‌ها3,050
تعداد مقالات34,082
تعداد مشاهده مقاله46,549,781
تعداد دریافت فایل اصل مقاله77,602,729
Emadi, A, Pourbakhsh, S. A, Fathi Najafi, M, Jamshidian, M, Amini, K. (1401). Combined Molecular and Biochemical Identification of Alpha Toxin in Local Isolated Clostridium novyi from the Sheep Liver. سامانه مدیریت نشریات علمی, 77(5), 1769-1777. doi: 10.22092/ari.2021.355381.1677
A Emadi; S. A Pourbakhsh; M Fathi Najafi; M Jamshidian; K Amini. "Combined Molecular and Biochemical Identification of Alpha Toxin in Local Isolated Clostridium novyi from the Sheep Liver". سامانه مدیریت نشریات علمی, 77, 5, 1401, 1769-1777. doi: 10.22092/ari.2021.355381.1677
Emadi, A, Pourbakhsh, S. A, Fathi Najafi, M, Jamshidian, M, Amini, K. (1401). 'Combined Molecular and Biochemical Identification of Alpha Toxin in Local Isolated Clostridium novyi from the Sheep Liver', سامانه مدیریت نشریات علمی, 77(5), pp. 1769-1777. doi: 10.22092/ari.2021.355381.1677
Emadi, A, Pourbakhsh, S. A, Fathi Najafi, M, Jamshidian, M, Amini, K. Combined Molecular and Biochemical Identification of Alpha Toxin in Local Isolated Clostridium novyi from the Sheep Liver. سامانه مدیریت نشریات علمی, 1401; 77(5): 1769-1777. doi: 10.22092/ari.2021.355381.1677

Combined Molecular and Biochemical Identification of Alpha Toxin in Local Isolated Clostridium novyi from the Sheep Liver

Archives of Razi Institute
مقاله 33، دوره 77، شماره 5، آذر و دی 2022، صفحه 1769-1777    اصل مقاله (704.61 K)
نوع مقاله: Original Articles
شناسه دیجیتال (DOI): 10.22092/ari.2021.355381.1677
نویسندگان
A Emadi1؛ S. A Pourbakhsh2؛ M Fathi Najafi* 2؛ M Jamshidian1؛ K Amini2
1Department of Pathobiology, Faculty of Veterinary Sciences, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran
2Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran
چکیده
Clostridium novyi (C. novyi) causes deadly Black disease in sheep and rarely in other animals. Alpha toxin (α-toxin), the most apparent pathogen of this disease, is produced by C. novyi type B. Economic damages of C. novyi include sheep mortality costs, depreciation of affected farms, and health problems with infected carcasses. The identification of C. novyi and isolation of its pathogens by conventional methods is a time-consuming process, necessitating a simple and rapid method for isolating and detecting pathogenic C. novyi. Therefore, this study aimed to molecularly identify α-toxin in local C. novyi isolates from the sheep livers. In this study, 75 livers suspected of Black disease were sampled. The samples of the liver were cultured under anaerobic conditions. Some of the cultured colonies were used in biochemical tests. For molecular confirmation, the DNA of isolates was extracted, and the isolates were confirmed by the polymerase chain reaction (PCR) on the liver tissue and cultured samples using specific α-toxin primers. The PCR on α-toxin produced a band in the range of 609 bp, indicating that the samples belonged to C. novyi. According to the results, of 75 isolates, 18 isolates were confirmed as C. novyi. C. novyi type B was isolated from the liver and confirmed by biochemical and molecular characterization. The PCR assay ensured a sensitive and specific tool for the detection of C. novyi in the samples.
کلیدواژه‌ها
Clostridium novyi؛ Isolation؛ PCR
عنوان مقاله [English]
شناسایی ترکیبی مولکولی و بیوشیمیایی آلفاتوکسین کلستریدیوم نویی بومی جدا شده از کبد گوسفند
چکیده [English]
کلستریدیوم نوویی عامل بیماری کشنده هپاتیت عفونی نکروزان در گوسفند و ندرتاً در سایر حیوانات می‌باشد. بارزترین فاکتور بیماریزایی آن آلفا توکسین (α-توکسین) است که توسط نوع B تولید می‌شود. خسارات اقتصادی بیماری شامل هزینه‌های مرگ و میر گوسفندان، استهلاک مزارع درگیر و مشکلات بهداشتی لاشه‌های آلوده است. تشخیص بیماری‌های کلستریدیایی و جداسازی عامل بیماری با روش‌های مرسوم وقت‌گیر می‌باشد، لذا نیاز به یک روش ساده و سریع برای جداسازی و تشخیص کلستریدیاهای پاتوژنیک می‌باشد. بنابراین، هدف از مطالعه حاضر، شناسایی ملکولی توکسین آلفا در جدایه‌های بومی کلستریدیوم نوویی از کبد گوسفند است. در این مطالعه، از تعداد 75 نمونه‌ کبد، مشکوک به بیماری قانقاریای عفونی کبد جمع‌آوری شد. نمونه های کبد در شرایط بی هوازی کشت داده شدند. تعدادی از کلنی های کشت داده شده برای تست های بیوشیمیایی مورد استفاده قرار گرفتند. برای تأیید مولکولی،DNA جدایه‌ها استخراج شد و جدایه‌های بافت کبد و نمونه‌های کشت شده با واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (PCR) و با استفاده از آغازگرهای اختصاصی α-توکسین، از نظر مولکولی بررسی شدند. با انجام PCR برای α-توکسین، باندی در محدوده 609 جفت باز ایجاد گردید و مشخص شد که نمونه‌های مورد بررسی به کلستریدیوم نوویی تعلق دارند. براساس نتایج، از 75 جدایه، 18 جدایه به عنوان کلستریدیوم نوویی تایید ملکولی شدند کلستریدیوم نوویی نوع B از کبد جدا شد و با خصوصیات بیوشیمیایی و مولکولی تایید شد. روش PCR ابزاری حساس و خاص است که تشخیص کلستریدیوم نوویی در نمونه‌ها را تضمین می‌کند.
کلیدواژه‌ها [English]
کلستردیوم نوویی, جداسازی, PCR
مراجع
  1. Aronoff DM. Clostridium novyi, sordellii, and tetani: mechanisms of disease. Anaerobe. 2013;24:98-101.
  2. Smits WK, Lyras D, Lacy DB, Wilcox MH, Kuijper EJ. Clostridium difficile infection. Nat Rev Dis Primers. 2016;2:16020.
  3. Sasaki Y, Takikawa N, Kojima A, Norimatsu M, Suzuki S, Tamura Y. Phylogenetic positions of Clostridium novyi and Clostridium haemolyticum based on 16S rDNA sequences. Int J Syst Evol Microbiol. 2001;51(Pt 3):901-4.
  4. Eklund MW, Poysky FT, Peterson ME, Meyers JA. Relationship of bacteriophages to alpha toxin production in Clostridium novyi types A and B. Infect Immun. 1976;14(3):793-803.
  5. Oakley CL, Warrack GH, Clarke PH. The toxins of Clostridium oedematiens (Cl. novyi). J Gen Microbiol. 1947;1(1):91-107.
  6. Eeckhaut V, Boyen F, Pasmans F, Uzal FA, Ducatelle R, Van Hoorebeke S, et al. Clostridium novyi type B as a causative agent of bovine meat spoilage. Anaerobe. 2012;18(3):286-8.
  7. Ball DW, Van Tassell RL, Roberts MD, Hahn PE, Lyerly DM, Wilkins TD. Purification and characterization of alpha-toxin produced by Clostridium novyi type A. Infect Immun. 1993;61(7):2912-8.
  8. Bhatnagar J, Deleon-Carnes M, Kellar KL, Bandyopadhyay K, Antoniadou ZA, Shieh WJ, et al. Rapid, simultaneous detection of Clostridium sordellii and Clostridium perfringens in archived tissues by a novel PCR-based microsphere assay: diagnostic implications for pregnancy-associated toxic shock syndrome cases. Infect Dis Obstet Gynecol. 2012;2012:972845.
  9. Jeong CG, Seo BJ, Nazki S, Jung BK, Khatun A, Yang MS, et al. Characterization of Clostridium novyi isolated from a sow in a sudden death case in Korea. BMC Vet Res. 2020;16(1):127.
  10. Navarro MA, Uzal FA. Pathobiology and diagnosis of clostridial hepatitis in animals. J Vet Diagn Invest. 2020;32(2):192-202.
  11. Paquet-Bolduc B, Gervais P, Roussy J-F, Trottier S, Oughton M, Brukner I, et al. Detection and Isolation of Clostridium difficile Asymptomatic Carriers During Clostridium difficile Infection Outbreaks: An Exploratory Study. Clin Infect Dis. 2018;67(11):1781-3.
  12. Skarin H, Segerman B. Plasmidome interchange between Clostridium botulinum, Clostridium novyi and Clostridium haemolyticum converts strains of independent lineages into distinctly different pathogens. PLoS One. 2014;9(9):e107777.
  13. Hofmann F, Herrmann A, Habermann E, von Eichel-Streiber C. Sequencing and analysis of the gene encoding the alpha-toxin of Clostridium novyi proves its homology to toxins A and B of Clostridium difficile. Mol Gen Genet. 1995;247(6):670-9.
  14. Sathish S, Swaminathan K. Genetic diversity among toxigenic clostridia isolated from soil, water, meat and associated polluted sites in South India. Indian J Med Microbiol. 2009;27(4):311-20.
  15. Woo PC, Lau SK, Chan KM, Fung AM, Tang BS, Yuen KY. Clostridium bacteraemia characterised by 16S ribosomal RNA gene sequencing. J Clin Pathol. 2005;58(3):301-7.
  16. Nyaoke AC, Navarro MA, Beingesser J, Uzal FA. Infectious necrotic hepatitis caused by Clostridium novyi type B in a horse: case report and review of the literature. J Vet Diagn Invest. 2018;30(2):294-9.
  17. Zaragoza NE, Orellana CA, Moonen GA, Moutafis G, Marcellin E. Vaccine Production to Protect Animals Against Pathogenic Clostridia. Toxins (Basel). 2019;11(9).
  18. Ardehali M, Moosawi M, Pilehchian R. Characterization of Clostridium oedematiens Strains Isolated from Cases of Black Disease of Sheep in Iran Arch Razi Inst. 1989;40(1):37-45.
  1. Ardehali M, Darakhshan H. Isolation and typing of Clostridium oedematiens (Cl. novyi) from cases of black disease of sheep in iran. Comp Immunol Microbiol Infect Dis. 1979;2(1):107-11.
  2. Pilehchian Langroudi R. Molecular biology of Clostridium perfringens focusing on epsilon and beta toxin genes. J Vet Lab Res. 2013;5(1):5-19.
  3. Ardehali M, Moosawi, Avazpoor J. Isolation, Typing and Rapid Diagnosis of pathogenic clostridia from Infected Animals in Iran. Arch Razi Inst. 1988;38.39(1):35-42.
  4. Abdolmohammadi Khiav L, Jabbari AR, Pilehchian Langroodi R. Molecular identification and evaluation toxin production ofclostridium perfringenstype d strains isolated cases of the enterotoxaemia in the razi institute. J Vet Microbiol. 2018;14(1):71-8.
  5. Songer JG. Clostridial diseases of small ruminants. Vet Res. 1998;29(3-4):219-32.
آمار
تعداد مشاهده مقاله: 2,422
تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 3,244


counter
سامانه مدیریت نشریات علمی. طراحی و پیاده سازی از سیناوب