| تعداد نشریات | 282 |
| تعداد نشریات سازمان | 80 |
| تعداد شمارهها | 3,168 |
| تعداد مقالات | 35,197 |
| تعداد مشاهده مقاله | 50,932,563 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 90,938,116 |
Identification of Iranian BHK-21-C5 Cell Line by Two Steps Polymerase Chain Reaction | ||
| Archives of Razi Institute | ||
| مقاله 3، دوره 76، شماره 2، شهریور 2021، صفحه 193-201 اصل مقاله (615.75 K) | ||
| نوع مقاله: Original Articles | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.22092/ari.2020.128637.1419 | ||
| نویسندگان | ||
| F Ziyaeifar1؛ S Soleimani* 2؛ M Lotfi3 | ||
| 1Department of Biology, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran | ||
| 2Department of Biobank, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agricultural Research Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran | ||
| 3Department of Viral Vaccine Quality Control, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agricultural Research Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran | ||
| چکیده | ||
| Authentication of animal cell lines in cell banks is one of the most important programs regulated during cell culture and storage. This operation provides a thorough and beneficial document which can be advantageous for the functional use of animal cell lines. Therefore, various procedures are used to prevent misidentified cells, cross-contamination to other cell lines, and mislabeling errors leading to incorrect assessment. These contaminants can result in major financial disadvantages. One of the practical methods in this field is a molecular procedure which can demonstrate more accurate results. In the present study, the BHK-21 (C5) was characterized, and it was tried to determine the identity of BHK-21 (C5) as a continuous cell line by Polymerase chain reaction (PCR) molecular procedure in Iran. The cytochrome c oxidase I (CO1) gene was selected as a prevalent DNA fragment for the authentication of the BHK-21 (C5) cell line, along with six cell lines, including Chinese hamster ovary, Lamb kidney, Razi Bovine Kidney, Medical Research Council cell strain 5, Monkey Green Kidney, and Goat Lymphocyte. After amplification, PCR products were analyzed by agarose gel electrophoresis to ensure their accuracy. The results of characterization were indicated, cell viability was estimated to be about 92%, and a uniform cell culture was obtained. The doubling time and µ ratio equivalent were obtained at 20.5 h and 0.03, respectively. Sterility tests revealed that the cell seed was free of bacterial, mycoplasma, and mycobacterial infections. The results of molecular identification revealed that the identification of this cell line was approved and can be used in studies, diagnosis, production, and quality control of biological products. | ||
| کلیدواژهها | ||
| Authentication؛ BHK-21-C5 cell line؛ PCR؛ Cytochrome c oxidase I (CO1) gene | ||
| عنوان مقاله [English] | ||
| تعیین هویت لاین سلولی BHK-21-C5 ایران با PCR دو مرحله ای | ||
| چکیده [English] | ||
| تعیین هویت لاین سلولی BHK-21-C5 موجود در ایران با استفاده از PCR دو مرحله ای چکیده فارسی تعیین هویت لاینهای سلولی حیوانی در بانکهای سلولی یکی از مهمترین برنامهها طی عملیات کشت سلول و ذخیره سازی سلول است که مستنداتی را ارائه میدهد که میتواند برای استفاده کاربردی از لاینهای سلولی حیوانی مفید باشد. بنابراین تلاشها برای جلوگیری از شناسایی نادرست سلولها، آلودگی متقاطع با لاینهای سلولی دیگر و خطا در لیبل گذاری با استفاده از روشهای مختلف ادامه دارد و اغلب منجر به ارزیابی نادرست میگردد. این آلودگیها در بسیاری از موارد غیر قابل جبران می باشد. یکی از روشهای کاربردی در این زمینه روش مولکولی است که میتواند نتایج را با دقت بیشتری نشان دهد. در این مطالعه خصوصیات BHK-21 (C5) تعیین شد و سعی شد هویت BHK-21 (C5) به عنوان یک لاین سلولی پیوسته در ایران به وسیله روش مولکولی PCR تعیین شود. در این مطالعه ژن سیتوکروم اکسیدازC (COI) به عنوان یک قطعه DNA رایج برای تعیین هویت لاین سلولی BHK-21(C5) در کنار شش لاین سلولی شامل،CHO, LK, RBK, MRC5, VERO, GL با استفاده از PCR و همچنین تکثیر هرلاین سلولی با پرایمر مخصوص خودش انتخاب شد. پس از تکثیر، محصولات PCR با ژل آگاروز الکتروفورز به منظور اطمینان از صحت آنها مورد بررسی قرار گرفت. نتایج آزمایشات نشان داد که درصد بقا حدود 92% تخمین زده شد و یک کشت سلول یک نواخت به دست آمد. زمان دو برابر شدن و نسبت μ معادل 5/20 ساعت و 03/0 بدست آمد. آزمایشات استریلیتی نشان داد که بذر سلول عاری از آلودگیهای باکتریایی، مایکوپلاسمایی و مایکوباکتریومی بود. نتایج شناسایی مولکولی این سلول نشان میدهد که تعیین هویت این لاین سلولی اثبات شده است و میتواند در تحقیقات، مطالعات تشخیصی و تولید و کنترل کیفیت فراورده های بیولوژیک مورد استفاده قرار گیرد. | ||
| کلیدواژهها [English] | ||
| تعیین هویت, لاین سلولی BHK-21-C5- ژن سیتوکروم C اکسیداز | ||
|
سایر فایل های مرتبط با مقاله
|
||
| مراجع | ||
|
Abercrombie, M., 1978. Fibroblasts. J Clin Pathol Supplement 12, 1-6.
ASN, A.T.C.C.S.D.O.W., 2010. Cell line misidentification: the beginning of the end. Nat Rev Cancer 10, 441.
Azari, S., Ahmadi, N., Tehrani, M.J., Shokri, F., 2007. Profiling and authentication of human cell lines using short tandem repeat (STR) loci: Report from the National Cell Bank of Iran. Biologicals 35, 195-202.
Cabrera, C., Cobo, F., Nieto, A., Cortés, J., Montes, R., Catalina, P., et al., 2006. Identity tests: determination of cell line cross-contamination. Cytotechnology 51, 45-50.
Cooper, J.K., Sykes, G., King, S., Cottrill, K., Ivanova, N.V., Hanner, R., et al., 2007. Species identification in cell culture: a two-pronged molecular approach. In Vitro Cell Dev Biol Anim 43, 344-351.
Cywinska, A., Hunter, F., Hebert, P.D., 2006. Identifying Canadian mosquito species through DNA barcodes. Med Vet Entomol 20, 413-424.
DeliveReD, G., 2012. Animal Cell Culture Guide. Wiley.
Drexler, H., Dirks, W., Matsuo, Y., MacLeod, R., 2003. False leukemia–lymphoma cell lines: an update on over 500 cell lines. Leukemia 17, 416-426.
Freshney, R.I., 2011. Culture of Animal Cells: A Manual of Basic Technique and Specialized Applications, Wiley.
Hebert, P.D., Cywinska, A., Ball, S.L., Dewaard, J.R., 2003. Biological identifications through DNA barcodes. Proceedings of the Royal Society of London 270, 313-321.
Hernandez, R., Brown, D.T., 2010. Growth and maintenance of baby hamster kidney (BHK) cells. Curr Protoc Microbiol 17, 1-7.
Hughes, P., Marshall, D., Reid, Y., Parkes, H., Gelber, C., 2007. The costs of using unauthenticated, over-passaged cell lines: how much more data do we need? Biotechniques 43, 575-586.
Lee, P.Y., Costumbrado, J., Hsu, C.-Y., Kim, Y.H., 2012. Agarose gel electrophoresis for the separation of DNA fragments. J Vis Exp 20, 3923.
Liu, M., Liu, H., Tang, X., Vafai, A., 2008. Rapid identification and authentication of closely related animal cell culture by polymerase chain reaction. In Vitro Cell Dev Biol Anim 44, 224-227.
Liu, M.Y., Lin, S.-C., Liu, H., Candal, F., Vafai, A., 2003. Identification and authentication of animal cell culture by polymerase chain reaction amplification and DNA sequencing. In Vitro Cell Dev Biol Anim 39, 424-427.
Masters, J.R., 2000. Human cancer cell lines: fact and fantasy. Nat Rev Mol Cell Biol 1, 233-236.
Mohammadi, A., Farzinpoor, M., Lotfi, M., Ghorbani, R., 2016. Comparative sensitivity analysis between two methods for species differentiation and interspecies cross contamination in animal cell culture. Arch Med Sci 2, 84-88.
Nema, R., Khare, S., 2012. An animal cell culture: Advance technology for modern research. Adv Biosci Biotechnol 3, 219-226.
Ono, K., Satoh, M., Yoshida, T., Ozawa, Y., Kohara, A., Takeuchi, M., et al., 2007. Species identification of animal cells by nested PCR targeted to mitochondrial DNA. In Vitro Cell Dev Biol Anim 43, 168-175.
Parodi, B., Aresu, O., Bini, D., Lorenzini, R., Schena, F., Visconti, P., et al., 2002. Species identification and confirmation of human and animal cell lines: a PCR-based method. Biotechniques 32, 432-440.
Rahikainen, A.-L., Palo, J.U., de Leeuw, W., Budowle, B., Sajantila, A., 2016. DNA quality and quantity from up to 16 years old post-mortem blood stored on FTA cards. Forensic Sci Int 261, 148-153.
Ramya, R., Nagarajan, T., Sivakumar, V., Senthilkumar, R., Obulapathi, B.B., Thiagarajan, D., et al., 2009. Identification of cross-contaminated animal cells by PCR and isoenzyme analysis. Cytotechnology 61, 81-92.
Stacey, G., 2000. Cell contamination leads to inaccurate data: we must take action now. Nature 403, 356.
Steube, K.G., Koelz, A.-L., Drexler, H.G., 2008. Identification and verification of rodent cell lines by polymerase chain reaction. Cytotechnology 56, 49-56.
Steube, K.G., Meyer, C., Uphoff, C.C., Drexler, H.G., 2003. A simple method using β-globin polymerase chain reaction for the species identification of animal cell lines—a progress report. In Vitro Cell Dev Biol Anim 39, 468-475.
Strober, W., 2015. Trypan blue exclusion test of cell viability. Curr Protoc Immunol 111, A3. B. 1-A3. B. 3.
Trivedi, S., Aloufi, A.A., Ansari, A.A., Ghosh, S.K., 2016. Role of DNA barcoding in marine biodiversity assessment and conservation: an update. Saudi J Biol Sci 23, 161-171. | ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 2,586 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 3,543 |
||
