تعیین شیوع مایکوپلاسما هومونیس و مایکوپلاسما جنیتالیوم در مردان نابارور در شمال شرق ایران با روشهای کشت و Multiplex-PCR | ||
| Archives of Razi Institute | ||
| Article 7, Volume 76, Issue 1, January 0, Pages 41-49 PDF (276.73 K) | ||
| Document Type: مقالات پژوهشی | ||
| DOI: 10.22092/ari.2019.125966.1338 | ||
| Abstract | ||
| امروزه ناباروری یکی از مشکلات اجتماعی و اقتصادی در سراسر جهان است. مایکوپلاسماهای ژنیتال از قبیل مایکوپلاسما هومینیس و مایکوپلاسما ژنیتالیوم در بسیاری از موارد باعث ایجاد اثرات نامطلوب بر باروری مردان می شوند. این مطالعه بر آن است که میزان شیوع مایکوپلاسما هومینیس و مایکوپلاسما ژنیتالیوم را بوسیله کشت ، PCR و multiplex PCR برای اولین بار در نمونه مایع منی مردان نابارور در شمال شرق ایران بررسی کند. در طی یک مطالعه توصیفی-مقطعی 100 نمونه مایع منی از مردان نابارور مراجعه کننده به کلینیک ناباروری مشهد از بهمن 1396 تا اردیبهشت 1397 جمع آوری شد. پس از تلقیح نمونه ها در محیط انتقالی، کشت در محیط های PPLO براث و PPLO آگار، رنگ آمیزی داینس و آزمایشات رایج بیوشیمیایی انجام شد. نمونه مایع منی براساس دستورالعمل WHO از نظر فاکتورهای رنگ، حجم، مایع شدن، ویسکوزیته، غلظت، pH، گلبول های سفید، مورفولوژی طبیعی، غلظت اسپرم های متحرک، غلظت اسپرم های فانکشنال و ایندکس حرکت مورد بررسی قرار گرفت. پس از استخراج DNA از تمامی نمونه ها، طی آزمایش PCR از پرایمرهای GPO1و MGSO بمنظور شناسایی ژن 16S rRNA متعلق به جنس مایکوپلاسما استفاده شد. همچنین آزمایشmultiplex PCR جهت شناسایی مایکوپلاسما هومینیس با استفاده از پرایمرهای اختصاصی (RNAH1& RNAH2) از ژن 16S rRNA و جهت شناسایی مایکوپلاسما ژنیتالیوم از پرایمرهایMG1 و MG2 از ژن 140-kDa Adhesion Protein انجام شد. نتایج حاصل ازPCR نشاندهنده وجود جنس مایکوپلاسما در %9 نمونه ها بود، درحالیکه با روش کشت 7 مایکوپلاسما (7%) جداسازی شد. توسط آزمایشات بیوشیمیایی ایزوله های مایکوپلاسما به عنوان مایکوپلاسما هومینیس شناسایی شد و از نظر مایکوپلاسما ژنیتالیوم منفی بودند. با multiplex PCR از 9 نمونه جنس مایکوپلاسما، 8 نمونه (8%) متعلق به مایکوپلاسما هومینیس بود و مایکوپلاسما ژنیتالیوم یافت نشد. میانگین سنی مردان نابارور تحت مطالعه و واجد عفونت مایکوپلاسمایی به ترتیب 31 و 30 سال بود. در این مطالعه هیچ ارتباط معنا داری میان عفونت مایکوپلاسمایی و اسپرم های غیرطبیعی دیده نشد. نتایج مطالعات میزان شیوع مایکوپلاسما هومینیس و مایکوپلاسما ژنیتالیوم در ایران بین 4/1 تا 40 درصد متفاوت است. تحقیقات متعددی با نتایج گوناگون، برای اثبات ارتباط بین عفونت مایکوپلاسمایی و غیرطبیعی شدن فاکتورهای مایع منی وجود دارد. | ||
| Keywords | ||
| ناباروری; مایکوپلاسما هومینیس; مایکوپلاسما ژنیتالیوم; مایع منی; Multiplex PCR | ||
|
Supplementary Files
|
||
| References | ||
|
Abusarah, E., Awwad, Z., Charvalos, E., Shehabi, A., 2013. Molecular detection of potential sexually transmitted pathogens in semen and urine specimens of infertile and fertile males. Diagn Microbiol Infect Dis 77, 283-286.
Ahmadi, M., Amirmozafari, N., Kazemi, B., Gilani, M., Jazi, F., 2010. Use of PCR to detect Mycoplasma hominis and Ureaplasma urealyticum from Semen samples of infertile men who referred to royan institute in 2009. Yakhteh Med J 12, 371-380.
Al-Sweih, N., Al-Fadli, A., Omu, A., Rotimi, V., 2012. Prevalence of Chlamydia trachomatis, Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium, and Ureaplasma urealyticum infections and seminal quality in infertile and fertile men in Kuwait. J Androl 33, 1323-1329.
Asgari, A., Nazari, R., Mohammad, S., Razavian, H., 2018. Investigation of Frequency of Mycoplasma hominis and Biological Parameters in Semen Sample of Men Referred to Qom Jihad Daneshgahi Infertility Treatment Center in 2016. Qom Univ Med Sci J 12, 81-88.
Bahaabadi, S.J., Moghadam, N.M., Kheirkhah, B., Farsinejad, A., Habibzadeh, V., 2014. Isolation and molecular identification of Mycoplasma hominis in infertile female and male reproductive system. Nephrourol Mon 6, e22390.
Baseman, J., Cagle, M., Korte, J., Herrera, C., Rasmussen, W., Baseman, J., et al., 2004. Diagnostic Assessment of Mycoplasma genitalium in Culture-Positive Women. J Clin Microbiol. 42, 203-211.
Borght, C., 2018. Fertility and infertility: Definition and epidemiology. ELSEVIER 62, 2-10.
Direkvand-Moghadam, A., Delpisheh, A., Khosravi, A., 2013. Epidemiology of female infertility; a review of literature. Biosci Biotechnol Res Asia 10, 559-567.
Gdoura, R., Kchaou, W., Chaari, C., Znazen, A., Keskes, L., Rebai, T., et al., 2007. Ureaplasma urealyticum, Ureaplasma parvum, Mycoplasma hominis and Mycoplasma genitalium infections and semen quality of infertile men. BMC Infect Dis 7, 129.
Golshani, M., Eslami, G., Ghobadloo, S.M., Fallah, F., Goudarzi, H., Rahbar, A.S., et al., 2007. Detection of Chlamydia trachomatis, mycoplasma hominis and Ureaplasma urealyticum by multiplex PCR in Semen sample of infertile men. Iran J Public Health 36, 50-57.
Horner, P., Gilroy, C., Thomas, B., Naidoo, R., Taylor-Robinson, D., 1993. Association of Mycoplasma genitalium with acute non-gonococcal urethritis Lancet (London, England) [Internet], pp. 582-585.
Jensen, J., Cusini, M., Gomberg, M., Moi, H., 2016. 2016 European guideline on Mycoplasma genitalium infections. J Eur Acad Dermatology Venereol 30, 1650-1656.
Jensen, J., Hansen, H., Seruminstitut, S., 1996. S D-C Strains from the Male Urethra. Microbiology 34, 286-291.
Jensen, J., Orsum, R., Dohn, B., Uldum, S., Worm, M., Lind, K., 1993. Mycoplasma genitalium: a cause of male urethritis? . Genitourin Med 69, 265-269.
Kong, F., James, G., Gordon, S., Gilbert, G., Zelynski, A., 2001. Species-Specific PCR for Identification of Common Contaminant Mollicutes in Cell Culture Species-Specific PCR for Identification of Common Contaminant Mollicutes in Cell Culture. Appl Environ Microbiol. 67, 3195-3200.
Korte, J., Baseman, J., Cagle, M., Herrera, C., Piper, J., Holden, A., et al., 2006. Cervicitis and genitourinary symptoms in women culture positive for Mycoplasma genitalium. Am J Reprod Immunol 55, 265-275.
Lee, J.S., Kim, K.T., Lee, H.S., Yang, K.M., Seo, J.T., Choe, J.H., 2013. Concordance of Ureaplasma urealyticum and Mycoplasma hominis in infertile couples: impact on semen parameters. Urology 81, 1219-1224.
Liu, J., Wang, Q., Ji, X., Guo, S., Dai, Y., Zhang, Z., et al., 2014. Prevalence of ureaplasma urealyticum, mycoplasma hominis, chlamydia trachomatis infections, and semen quality in infertile and fertile men in China. Urology 83, 795-799.
Moghadam, N., Kheirkhah, B., Mirshekari, T., Harandi, F., Tafsiri, E., 2014. Isolation and molecular identification of mycoplasma genitalium from the secretion of genital tract in infertile male and female. Iran J Reprod Med 12, 601-608.
Moghaddam, H., Kheirkhah, B., Amirheidari, B., 2015. A Comparison between the Molecular Identity of Mycoplasma Hominis in Urine Samples of Patients with Urinary Tract Infections and Similar Strains Available in GenBank. J Babol Univ Med Sci 17, 67-73.
Moretti, E., Capitani, S., Figura, N., Pammolli, A., Federico, M., Giannerini, V., et al., 2009. The presence of bacteria species in semen and sperm quality. J Assist Reprod Genet 26, 47-56.
Ona, S., Molina, R.L., Diouf, K., 2016. Mycoplasma genitalium: an overlooked sexually transmitted pathogen in women? Infectious diseases in obstetrics and gynecology 2016, 4513089.
Organisation, W.H., 1999. WHO laboratory manual for the examination of human semen and sperm-cervical mucus interaction, Cambridge University press.
Rahbar, A.S., Golshani, M., Fayyaz, F., Tabatabaei, S.R., 2007. Detection of Mycoplasma DNA from the sperm specimens of infertile men by PCR. Iran J Med Microbiol 1, 47-53.
Razin, S., Tully, J., 1995. Molecular and Diagnostic Procedure s in Mycoplasmology, Academic Press Inc.
Sabo, M., Reno, H., Presti, R., Stoner, B., 2013. Expanded Extragenital Testing For Neisseria Gonorrhoeae and Chlamidia Trachomatis Identifies High Rates of Asymptomatic Infection in Persons Living with HIV. Sex Transm Infect. 89, 191-198.
Safavifar, F., Bandehpour, M., Hosseiny, S., Khorramizadeh, M., 2015. Mycoplasma Infection in Pyospermic Infertile and Healthy Fertile Men. Nov biomed 3, 25-29.
Stellrecht, K., Woron, A., Mishrik, N., Venezia, R., 2004. Comparison of Multiplex PCR Assay with Culture for Detection of Genital Mycoplasmas. J Clin Microbiol 42, 1528-1533.
Stojanov, M., Baud, D., Greub, G., Vulliemoz, N., 2018. Male infertility: the intracellular bacterial hypothesis. New Microbes New Infect 26, 37-41.
Svenstrup, H., Fedder, J., Abraham-Peskir, J., Birkelund, S., Christiansen, G., 2003. Mycoplasma genitalium attaches to human spermatozoa. Hum Reprod 18, 2103-2109.
Tabatabaei-Qomi, R., Sheykh-Hasan, M., Fazaely, H., Kalhor, N., Ghiasi, M., 2014. Development of a PCR assay to detect mycoplasma contamination in cord blood hematopoietic stem cells. Iran J Microbiol 6, 281-284.
Taken, K., 2016. Prevalence of Ureaplasma and Mycoplasma in Infertile Men in Van Region and Effects to Semen Parameters. J Clin Anal Med 7, 4-7.
Tsai, C.-C., Li, C.-C., 2013 Nonchlamydial nongonococcal urethritis in men. Urol Sci 24, 73-77.
Vosooghi, S., Kheirkhah, B., Mir-shekari, T.-R., Nik, A.K., Hamidavi, S.M., Moghadam, N.M., 2013. Molecular detection of Mycoplasma hominis from genital secretions of infertile men referred to the Kerman infertility center. J Microb World 6, 14-22.
Yoshida, T., Maeda, S.-I., Deguchi, T., Ishiko, H., 2002. Phylogeny-based rapid identification of mycoplasmas and ureaplasmas from urethritis patients. J Clin Microbiol 40, 105-110.
Zinzendorf, N., Kouassi-Agbessi, B., Lathro, J., c, D., koudio, l., Guillaume, L., 2008 Ureaplasma Urealyticum or Mycoplasma Hominis Infections and Semen Quality of Infertile Men in Abidjan. J Reprod Contracept 19, 65-72. | ||
|
Statistics Article View: 2,269 PDF Download: 3,236 |
||
Journal management system. designed by sinaweb